批發(fā)批發(fā)|BCA法蛋白含量測定試劑盒|酶標(biāo)法

產(chǎn)品簡介：

測定原理

堿性條件下，蛋白質(zhì)中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽鍵，能將Cu2+還原成Cu+，2分子的BCA與Cu+結(jié)合，生成紫色絡(luò)合物，在540-595nm有吸收峰，562nm處吸收峰強(qiáng)。

試劑組成和配置

試劑A×1瓶，40ml，4℃保存

試劑B×1瓶 ，1ml，4℃保存

    5mg/ml標(biāo)準(zhǔn)蛋白×1支，-20℃保存

工作液配制：臨用前將試劑A與試劑B按50:1混合，需要多少，配置多少

標(biāo)準(zhǔn)蛋白配制：取5mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)蛋白，分別配制0，25，50，100，200，400，800，1000μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)濃度蛋白，用于標(biāo)準(zhǔn)曲線制作。（先取5mg/ml標(biāo)準(zhǔn)蛋白20μl加稀釋液80μl，即為1000μg/ml，取后者40μl，加稀釋液10μl，即為800μg/ml，之后按上一標(biāo)準(zhǔn)液與稀釋液按1:1混合，即可配制下一標(biāo)準(zhǔn)液，依次配制400，200，100，50，25μg/ml標(biāo)準(zhǔn)蛋白。）

測定操作

取10μl配置好的標(biāo)準(zhǔn)液與10μl待測液分別加入酶標(biāo)板中，然后加200μl工作液，充分混勻，于60℃水浴30min取出后冷卻至室溫，或室溫放置2h后，于562nm處測定，記錄吸光值。

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)蛋白濃度，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后在標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取待測液蛋白濃度。

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