淀粉含量檢測試劑盒 可見分光光度法

產品簡介

產品內容：  

試劑一：液體50mL×1瓶，4℃保存；

試劑二：液體20mL×1瓶，4℃保存；

試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存。

產品說明：  

淀粉是植物中糖的主要儲存形式，其含量測定對于評價食品營養價值和調查植物體內糖代謝都有重要意義。利用80％乙醇可以把樣品中可溶性糖與淀粉分開，進一步采用酸水解法分解淀粉為葡萄糖，采用蒽酮比色法測定葡萄糖含量，即可計算淀粉含量。

需自備儀器和試劑：  

可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、玻璃比色皿、研缽、冰、濃硫酸和蒸餾水。

操作步驟：  

一、淀粉提取：  

1、 稱取0.1g-0.2g樣品（建議稱取約0.1g樣本）于研缽中研碎，加入1mL試劑一，充分勻漿后轉移到EP管中，80℃水浴提取30min，3000g，常溫離心5min，棄上清，留沉淀。

2、 沉淀中加入0.5mL蒸餾水，放入沸水浴中糊化15min（蓋緊，以防止水分散失）。

3、 冷卻后，加入0.35mL試劑二，常溫提取15min，振蕩3-5次。

4、 加入0.85mL雙蒸水，混勻，3000g，常溫離心10min，取上清液待測。

二、測定操作：

1. 分管光度計預熱30min以上，調節波長至620nm，蒸餾水調零。

2. 調節水浴鍋 至95度。

3. 工作液的配制：臨用前在試劑三中加入7.5mL蒸餾水后，緩慢加入42.5mL濃硫酸，不斷攪拌，充分溶解，待用。用不完的試劑4℃保存一周。

4. 樣本測定：取0.2mL樣本和1mL工作液至EP管中，95度水浴10min（蓋緊，放置水分散失），自然冷卻至室溫，在620nm波長下記錄測定吸光值A。

淀粉含量計算：

標準條件下測定的回歸方程為y = 5.872x - 0.0295；x為標準品濃度（g/mL），y為吸光值。

1、 按照蛋白濃度計算

淀粉含量（mg/mg prot）＝﹝(A+0.0295)×V1﹞÷5.872÷(V1×Cpr) =0.17×(A+0.0295) ÷Cpr

2、 按樣本鮮重計算

淀粉含量（mg/g 鮮重）＝ ﹝(A+0.0295)×V1﹞÷ (W×V1÷V2) =0.289×(A+0.0295) ÷W

V1:加入反應體系中樣本體積，0.2mL；V2：加入提取液體積，1.7 mL；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g。

注意事項：  

1. 由于工作液具有強腐蝕性，請謹慎操作。

2. 若吸光值大于1，請將樣本用提取液稀釋后再測定，計算公式中乘以相應的稀釋倍數。

3. 提取液的配置：0.35mL試劑二+1.35mL水。用多少按照此比例配多少。

備注：以上數據均來自公開文獻, Solarbio暫未進行獨立驗證, 僅供參考。These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.
實驗圖Standard Curve for Starch Content Assay Kit

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